Salmonella Big Five - ISO 6579-3

Tilbage

Generelt

Salmonella Big Five er et komplet kit til serotypning af de 5 mest udbredte Salmonella typer, der er blevet isoleret hos mennesker og som indgår i ISO 6579-3, der er under udvikling.  

De 5 Salmonella-typer kan medføre alvorlig madforgiftning og tyfusfeber. Disse Salmonella-infektioner er igennem de seneste år blevet mere udbredte, og det er derfor vigtigt at kunne serotype Salmonella bakterien hurtigt.

Produktbeskrivelse

Salmonella Big Five anvendes til screening for Salmonella Typhimurium, Salmonella Enteritidis, Salmonella Infantis, Salmonella Virchow, Salmonella Hadar i henhold til ISO 6579-3.

Kittet indeholder alle antisera der er nødvendige for screening af de 5 Salmonella. Det gælder alle O antisera (O:4, O:8, O:61, O:7, O:46), H antisera (H:q,s,t,p,u, H:i, H:r, H:z10, H:m, H:x, H:2, H:5) og H-faseinversion (SG 1, SG 2, SG 5, SG 6, H:r).

Serum leveres i små dråbeflasker med 3 mL, der rækker til 150 reaktioner.
Opbevares ved 2–8° C grader. Antisera kan også købes enkeltvis.

Anvendelse

Salmonella O- og H-antiserum anvendes til serotypning vha. objektglasagglutination. Kultur fra flere kolonier blandes med ca. 20 µL antiserum. Objektglasset vippes forsigtigt frem og tilbage og resultatet aflæses inden for 5-10 sekunder.


 
Fremgangsmåde O-antisera: 
Serotypningen startes ofte ved at anvende O-gruppe pool antisera OMA til OMG. Herefter bestemmes O-gruppen ved at teste med de relevante O-gruppeantisera. O-faktorantisera anvendes til at identificere eventuelle O-faktorer, som kan være udtrykt i kombination med O-gruppeantigener. 

Har man en formodning om, at et isolat er f.eks. S. Enteritidis, kan man springe O-gruppe pool antiserane over i første omgang og starte med at undersøge med O-gruppeantiserum O:9. Agglutinerer isolatet med serum, forsættes med O-faktorantisera O:12. Hvis der ikke ses agglutination med O:9, anvendes de forskellige O-gruppe pool antisera. Efter identificering af O antigenerne fortsættes med H-fase pool-antisera.

Fremgangsmåde H-antisera:
Ved brug af Salmonella H antiserum til objektglasagglutination tages kultur fra kanten af Salmonella-sværmen og blandes med ca. 20 µL antiserum. Objektglasset vippes forsigtigt frem og tilbage og resultatet aflæses inden for 5-10 sekunder. 

Fremgangsmåde H-faseantiserum til faseinversion:
Cirka 100 µL antiserum blandes med 10 mL sværmagar i en petriskål med en diameter på 6 cm. Petriskålen stilles på niveaubord ved stuetemperatur til mediet er afkølet. Der overføres Salmonella kultur fra fast medie til midten af petriskålen uden at bryde overfladen på sværmagaren og petriskålen stilles ved 370C natten over.

Næste dag serotypes der vha. objektglasagglutination med kultur fra kanten af den udvoksede Salmonella-sværm, som beskrevet ovenfor. 

Eksempel: 
En kultur af S. Typhimurium (1,4,[5],12:i:1,2) vil udtrykke enten første-fase-antigenet, i, eller anden-fase-antigenet, 1,2. Udtrykker kulturen antigenet, i, ved den primære typning (uden antiserum i sværmagaren), vil der observeres agglutination med serum HMA og herefter med H:i.

Anden fase (1,2) fremelskes herefter ved at dyrke kulturen på en 
sværmagarplade indeholdende faseinversionssera SG2, (et SG pool antiserum) der hæmmer bakterier som udtrykker flagelantigen i. Sværmen på dette medium vil agglutinere med HMD og H:2. Det kan også være anden-fase-antigenet, som udtrykkes ved den primære typning. I dette tilfælde skal man hæmme anden fase vha. faseinversionsserum SG6 for at kunne bestemme første fase.

Endelig er der nogle tilfælde, hvor bakterier, der udtrykker første og anden fase, er ligeligt repræsenteret i kulturen og den primære typning (uden antiserum i sværmagaren) vil derfor vise agglutination med både antiserum HMA, HMD, H:i og H:2.

Sortiment

ArtikelnummerProduktAntal testEnhed
89074 Salmonella Big Five - ISO 6579-3 150  20x3 mL 

Reference

1. ISO/TR 6579-3 Guideline  "Microbiology of food and animal feed - Horizontal method for the detection, enumeration and serotyping of Salmonella"

Tilbage

Kontakt

SSI Diagnostica A/S
Herredsvejen 2
3400 Hillerød

Tel.: 4829 9100 (omstilling)
info@ssidiagnostica.com

Bestilling:
ivdbestilling@ssidiagnostica.com
Tel.: 4829 9125